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（1） 96孔酶标板：1块。

（2）标准品液:（1.0ml/瓶）0ppb、0.1ppb、0.4ppb、1.6ppb、6.4ppb、25.6ppb。

（3）酶标记物： 1瓶（12ml）。

（4）抗体工作液： 1瓶（7ml）。

（5）底物缓冲液： 1瓶（7ml）。

（6）底物液： 1瓶（7ml）。

（7）终止液： 1瓶（7ml）。

（8） 20倍浓缩洗液：（50ml）加蒸馏水稀释到1000ml。

（9）提取液A

（10）提取液B

操作说明:

（1）将标准品、样品所需微量反应板（均需2个平行试验）放在反应架上。

（2）加入50μl的标准液或处理好的样品到各自的微孔板中。

（3）加入50μl已稀释的抗体应用液加入微量反应板，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后，室温下反应30分钟。

（4）弃去孔中液体，并将微孔板剩余残液在吸水纸上拍干。每孔注满稀释好的洗液，轻轻振荡，放置2分钟，弃去孔中液体，并在吸水纸上拍干，重复5次。

（5）加入100μl酶标记物应用液到微孔板中，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后，室温下反应20分钟。

（6）弃去孔中的液体，并在吸水纸上拍干，每孔注满稀释好的洗液，轻轻振荡，放置2分钟，弃去孔中液体，并在吸水纸上拍干，重复5次。

（7）加底物缓冲液50μl，再加入底物液50μl，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后，在室温避光处孵育10分钟。

（8）加入50μl终止液到微孔板中，混合好在450nm处测量吸光度值，在加入停止液后10分钟内读取光度值。

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